本文章引用：LY/T 2230—2013《人造板防霉性能評價(jià)》

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了人造板的防霉性能檢驗(yàn)方法和人造板防霉質(zhì)量分級。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于人造板的防霉性能檢驗(yàn)和評價(jià)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 1741漆膜耐霉菌性測定法

GB/T 18261—2013防霉劑對木材霉菌及變色菌防治效力的試驗(yàn)方法

3術(shù)語和定義

GB/T 1741和GB/T 18261—2013界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

防霉人造板mold-resistant wood-based panels

人造板材表面霉菌生長分級為0級或1級的人造板。

4人造板防霉性能檢驗(yàn)方法

4.1儀器設(shè)備與器皿

4.1.1蒸汽高壓滅菌器：最高設(shè)計(jì)溫度138℃,最高設(shè)計(jì)壓力0.25 MPa。

4.1.2超凈工作臺(tái)：潔凈等級不低于100級。

4.1.3恒溫恒濕培養(yǎng)箱：控溫范圍(0～65)℃,控濕范圍60%～90%。

4.1.4天平：感量0.01g.

4.1.5移液器：1000μL。

4.1.6離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥5000 r/min。

4.1.7生物光學(xué)顯微鏡：40×~400×。

4.1.8血球計(jì)數(shù)板：醫(yī)學(xué)和微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)用。

4.1.9培養(yǎng)皿：直徑90 mm。

4.1.10酒精燈、燒杯、鑷子等。

以上產(chǎn)品我公司都有生產(chǎn)和經(jīng)銷，采購請聯(lián)系我公司銷售人員。

4.2主要材料及準(zhǔn)備

4.2.1無菌濾紙

定性試紙，尺寸為(25±1)mm×(25±1)mm,置于121℃、0.1 MPa壓力蒸汽滅菌器中保持30 min滅菌后備用。

4.2.2滅菌處理

培養(yǎng)皿、試管和移液器槍頭等需要滅菌的用品，使用前需用普通報(bào)紙或牛皮紙袋包裝好后，置于壓力蒸汽滅菌器中，用溫度121℃、壓力0.1 MPa,滅菌30 min。

4.3試劑和培養(yǎng)基

4.3.1消毒劑：75%乙醇溶液。

4.3.2潤濕劑：吐溫80、N-甲基乙磺酸(N-methyltaurine)、二辛磺化丁二酸鈉(Dioctyl Sodium Sulp-hosuccinate)中任選一。

4.3.3察氏(Czapek)培養(yǎng)基：

——硝酸鈉(NaNO?),2.0g;

———磷酸氫二鉀(K?HPO?),1.0g;

——氯化鉀(KCI),0.5g;

——硫酸鎂(MgSO?·7H?O),0.5g;

——硫酸亞鐵(FeSO?),0.01g;

——蔗糖，30g.

取上述成分加入1000 mL0.05%潤濕劑水溶液中，加熱溶解后，用0.1mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH使其在(25±1)℃時(shí)pH為6.5,分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)121℃,0.1 MPa壓力滅菌30 min。

上述1000 mL培養(yǎng)液中加入15 g瓊脂，加熱熔化，用0.1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH使其在(25±1)℃時(shí)pH為6.5,配制固體培養(yǎng)基，分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)121℃、0.1 MPa壓力滅菌30 min。

4.3.4馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基(PDA):

——去皮馬鈴薯，200g;

——蔗糖，(20～30)g;

——瓊脂，(15～20)g;

——蒸餾水，1000 mL。

洗凈去皮馬鈴薯200 g,切成小塊，加水適量煮沸30 min后過濾，在過濾液中加入葡萄糖20 g、瓊脂(20～25)g,加水定容至1000 mL,再加熱，待瓊脂溶化后分裝在3個(gè)500 mL細(xì)口三角瓶內(nèi)，瓶口加棉花塞并包防水紙，置于蒸汽滅菌器中，壓力0.1 MPa,溫度121℃,滅菌30 min。滅菌后的培養(yǎng)基先放于無菌室或超凈臺(tái)上冷卻至不燙手時(shí)，倒人已滅菌的培養(yǎng)皿(直徑10 cm)中，每個(gè)培養(yǎng)皿(15～20)mL,制成平板培養(yǎng)基備用。

4.4檢驗(yàn)菌種

人造板防霉性能檢驗(yàn)菌種見表1。

表1人造板的防霉性能檢驗(yàn)菌種

4.5試件制作與處理

與受檢樣品試件相同的材料、相同的加工工藝制成的空白對照人造板，裁制尺寸為(50±1)mm×(50±1)mm,厚度為公稱厚度，編號為A。受檢人造板試件尺寸與A相同，編號為B。以上各類試件數(shù)量均不少于6個(gè)。檢驗(yàn)前應(yīng)在超凈工作臺(tái)進(jìn)行表面消毒，用75%乙醇溶液擦拭樣品表面，1min后用無菌水沖洗，自然干燥后備用。

4.6檢驗(yàn)步驟

4.6.1菌種活化

將保藏菌種接種在PDA培養(yǎng)基中，培養(yǎng)(7～14)d,在菌絲長滿皿之前制備孢子懸浮液。每次制備孢子懸浮液必須使用新培養(yǎng)的霉菌孢子。

4.6.2混合孢子懸浮液的制備

按GB/T 18261—2013中4.5.3的規(guī)定進(jìn)行。

4.6.3平板培養(yǎng)基的制備

培養(yǎng)皿中注人查氏瓊脂培養(yǎng)基，厚度(3～6)mm,凝固后48h內(nèi)使用。

4.6.4霉菌活性控制

無菌濾紙鋪在平板培養(yǎng)基上，用裝有新制備的混合孢子懸浮液的噴霧器噴孢子懸浮液1.0 mL,使其充分均勻地噴在培養(yǎng)基和濾紙上。在溫度(28±2)℃,相對濕度(80±5)%的條件下培養(yǎng)14 d,濾紙上應(yīng)明顯有菌生長，否則應(yīng)重新制備孢子懸浮液。

4.6.5試件檢驗(yàn)

4.6.5.1將空白對照試件(A)和受檢試件(B)同時(shí)分別鋪在培養(yǎng)基上，每一培養(yǎng)皿放置一塊試件。噴孢子懸浮液1.0 mL,使其充分均勻地噴在培養(yǎng)基和樣品上。每組3個(gè)試件。在溫度(28±2)℃,相對濕度(80士5)%的條件下培養(yǎng)28 d.

4.6.5.2觀測試件上表面霉菌生長狀況，空白對照樣(A)長霉面積應(yīng)大于等于整個(gè)上表面積的10%,否則不能作為該檢驗(yàn)的空白對照樣品，整個(gè)檢驗(yàn)需重做。

4.6.5.3表面未見霉點(diǎn)的樣品取出時(shí)需立即在生物光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察。

4.6.6二次檢驗(yàn)

按4.6.1～4.6.5重復(fù)進(jìn)行二次檢驗(yàn)。

4.7檢驗(yàn)結(jié)果

取兩次檢驗(yàn)每組試件上霉菌感染面積的平均值作為霉菌感染的分級值。霉菌感染分級見表2。

表2人造板試件表面霉菌生長分級表

5人造板防霉質(zhì)量分級

人造板防霉質(zhì)量分級見表3。表面霉菌生長分級0級或1級的人造板為防霉人造板。

表3人造板防霉質(zhì)量分級